在研究疾病的细胞模型中,你或许希望在过表达、敲降或敲除潜在药物靶点的基础上,高通量筛选药物分子库,从而鉴定出潜在的治疗药物,又或者是需要进行特定物质细胞毒性的检测,比如药物筛选, 那你可以通过细胞毒性检测来筛选敏感化合物,或者筛选不同细胞系对某一化合物多个浓度的敏感性。
细胞功能实验是通过体外实验,直接评估细胞或细胞内分子的功能,例如代谢、增殖、凋亡等。这类实验通常需要将细胞分离或体外培养,并将其暴露在特定的实验条件下以观察其功能变化。其中一些实验可能会涉及到基因编辑或药物处理等操作,以研究细胞功能的生物学机制。
从理论假说的角度来看,凋亡细胞释放的小分子通过调控SLC2A1和SLC16A1的表达,调控糖酵解和乳酸代谢,构建出一个促进吞噬细胞胞葬并维护机体稳态的复杂网络。这个研究展示了生物信息学与实验生物学的巧妙结合,为我们理解细胞死亡后的处理机制提供了新的启示。
学妹在研究生阶段就能熟练掌握CCK-MTT、划痕实验、transwell等表型检测技术,这得益于解螺旋整理的全面实验资源包。这个资源包包含了细胞增殖、凋亡、迁移黏附侵袭、染色质构象检测方法,以及经典文献解读,由高级讲师猫大老师亲授实操技巧,适合科研人员提升实验技能。
不是。因为Transwell染色后是需要一段时间的反映,才会出现相应的结果,如果直接拍照可能导致最后数据有误差或者不准确。
可以用这个办法处理:先用PBS洗两次,擦去膜上层细胞,甲醇固定20min,0.1%结晶紫染色15-20min,用PBS洗掉多余的染色就好了。结晶紫是先配成0.5%的储液,用的时候再用PBS稀释,称0.5g结晶紫,溶到100mlPBS中。
最好是24小时。实验前将保存在-20℃的基质胶转移至4℃冰箱融化过夜,使用前用无血清培养基按培养基:基质胶=2:1的比例稀释;接种前将24孔板和Transwell小室用1×PBS浸泡5min湿润小室。用胰蛋白酶消化细胞后,用无血清培养液洗涤细胞,用含有1%FBS的培养基重悬细胞计数。